大肠菌群和三种致病菌检测试剂盒  使用说明书

1.适用范围：适用于各类食品、纯净水等样品中大肠菌群数检测，致病菌（沙门氏菌、志贺菌、金黄色葡萄球菌）的快速筛查或进一步检测。

2.方法原理：与国标法相同。事先将浓缩乳糖胆盐培养基、亚硒酸盐胱氨酸增菌液、GN增菌液、7.5%氯化钠培养基、包被在试剂盒中，随时取用。

3.试剂盒的组成：试剂盒由三个大发酵培养基管（孔）（1、2、3）、七个小发酵培养基管（孔）（4、5、6、7、8、9、10）和三个致病菌增菌培养基管（孔）（A、B、C）组成。1-10孔包被浓缩乳糖胆盐培养基，设有集气窗代替倒管观察产酸产气情况。A孔包被浓缩亚硒酸盐胱氨酸增菌液、B孔包被浓缩GN增菌液、C孔包被浓缩7.5%氯化钠培养基。A孔为沙门菌增菌，B孔为志贺菌增菌，C孔为金黄色葡萄球菌增菌。

4.操作方法：

4.1 样品处理：按《食品卫生微生物学检验》GB/T4789.3.4.5.10-2003。

4.2 加样：将试剂盒放在台面上，打开盒盖，用无菌吸管吸取3个1：10稀释液10mL分别加入试剂盒3个大发酵培养基孔内，用无菌吸管吸取3个1mL分别加入试剂盒3小发酵培养基孔内。另用无菌吸管取1：10稀释后的样品1mL注入到9mL灭菌生理盐水中（1：100）取此管3个1mL稀释液加入到试剂盒另3个小发酵培养基孔内。另用无菌吸管吸取稀释后的样品3个4mL分别加入致病菌增菌管（孔）（A、B、C）孔内。

4.3 排气泡: 加样后集气窗内如有气泡存在，可将试剂盒以30～45度角倾斜，（图1）必要时可轻轻用力在桌面敲击数下即可排出集气窗内气泡。

4.4 培养：将加样后的试剂盒置36℃± 1℃温箱中，培养18～24h。

4.5 观察结果：样液变为黄色为产酸、集气窗中有气泡为产气，既产酸产气的样品为阳性结果，见图2、图3。根据试剂盒的阳性管数，参照国标GB/T4789.3-2003的方法查MPN检索表报告结果。如致病菌增菌培养基管（孔）有浑浊现象时，即预示着有对应致病菌的存在，可将浑浊样液接种对应培养基按GB/T4789.4.5.10进一步检测。

5. 注意事项：

5.1加入样品后不需摇匀，平拿平放。

5.2 加样时可用一次性无菌塑料吸管，将样品稀释液加至试剂盒所标刻度处。

5.3 在培养箱中取试剂盒时应平托出来，不要倾斜以免由于试剂盒的倾斜将阳性管集气窗中的气泡排出而影响结果。

5.4 试剂盒为一次性无菌用品，供一次性使用。