黄曲霉毒素B₁速测卡使用说明书

方法编号：CDC-5512

1.适用范围与检测意义：本品适用于谷物、饲料、食用油、调料和发酵酒等物质中黄曲霉毒素B₁（Aflatoxin B₁简写为AFB₁）的快速检测。黄曲霉毒素B₁是目前已知的化学物质中致癌性很强的一种，对人和若干动物具有强烈的毒性，其毒性作用主要是对肝脏的损害。黄曲霉毒素B₁是大部分食品的必检项目之一。

2.测定原理：本品采用高度特异性抗体抗原反应及免疫层析分析技术，通过单克隆抗体竞争结合AFB₁-BSA偶联物和样品中可能含有的AFB₁的原理。试剂含有被事先固定于膜上测试区（T）的AFB₁-BSA偶联物和被胶体金标记的抗AFB₁单克隆抗体。检出限为5ng/ml。

3.所用器皿：常量天平±0.1g；蒸发皿或烧杯；量筒；滴管；移液管；小型粉碎机；离心机等。

4.样品制备

4.1谷物与饲料：取5g以上有代表性样品并充分粉碎，准确称取2.0g均匀试样于15ml离心管中，向离心管中准确加入2ml纯净水和8.0ml的乙酸乙酯，将瓶塞盖紧密封，充分振荡5min，4000rpm离心1分钟，将上清液用吸管吸出2.0ml到小玻璃杯中，用电吹风吹干液体，根据不同样品对黄曲霉毒素B1（AFB₁）的*要求不同，参考下表将不同体积的稀释液加入到已吹干的杯子中，用吸管反复冲洗杯底和杯壁，使残渣*溶解，此溶解液即为样品检测液。

4.2食用油：称取2.0g油样于小烧杯中，用8ml正己烷分次将试样转移至分液漏斗中，准确加入4ml纯净水充分振荡3min,吸去上层正己烷层,再加入4ml的乙酸乙酯，将瓶塞盖紧密封，充分振荡5min，静置或离心得上清液，将上清液吸出2ml到小玻璃杯中，用电吹风吹干，参照表格，根据AFB₁*，量取相应体积稀释液复溶杯底固体。此溶解液即为检测液。

4.3酱油、醋：准确量取2.0ml样品于15ml离心管中，准确加入4.0ml乙酸乙脂，塞紧瓶塞后充分震荡5min，静置1~2min，待溶液分层以后将上清夜用移液枪（或移液管，吸管）全部转移到另一只15ml离心管中，加入2.0ml 0.05M Na₂CO3溶液，充分震荡3min，用吸管取2mL上清液到小玻璃杯中，吹干滤液，参照表格，根据AFB₁*，量取相应体积稀释液复溶杯底固体。此溶解液即为检测液。

4.3发酵酒：准确量取2.0ml样品于15ml离心管中，准确加入4.0ml乙酸乙脂，塞紧瓶塞后充分震荡5min，静置1~2min，待溶液分层以后用吸管取2mL上清液到小玻璃杯中，吹干滤液，参照食用油样品制备表格，根据AFB₁*，量取相应体积稀释液复溶杯底固体。此溶解液即为检测液。

5测定

5.1 使用前将试纸卡和待检样本溶液恢复至室温。

5.2 从原包装袋中取出试纸卡，打开后平放在桌面上，在1小时内尽快地使用。

5.3 用滴管吸取待检样品溶液，滴加3滴于加样孔中，加样后开始计时。

5.4 结果应在5min时读取，超过10min的时间判读无效。

6结果判定

6.1阳性：C线显色，T线不显色，判为阳性。

6.2阴性：C线显色，T线肉眼可见，无论颜色深浅均判为阴性。

6.3无效：C线不显色，无论T线是否显色，该试纸均判为无效。

7说明

7.1本品为一次性产品，勿重复使用。

7.2如遇稀释液不足，可用蒸馏水加入稀释液中混匀后使用。

7.3本品为筛选方法，任何阳性结果请用其它方法作进一步确认。

7.4有条件的实验室可以用AFB1标准品作为判断参考。

7.5本品应保存在干燥阴凉处（4-30℃），有效期18个月。

8包装：试纸卡5片，稀释液1瓶，15ml离心管1支。